Туберкулозният бацил е грам положителен. Микобактерии. Променливост на морфологията на MBT

Съдържание на темата "Микобактерии. Туберкулоза.":

М. туберкулоза (Пръчката на Кох) - тънка, права или леко извита пръчка с размери 1-10 * 0,2-0,6 микрона, с леко заоблени краища (фиг. 22-1). При младите култури пръчките са по-дълги, а при старите са склонни към разклоняване.

Туберкулозни бактерииспособни да образуват L-форми, които запазват способността да инфектират, както и филтрируеми форми, чиято патогенетична роля остава слабо разбрана. Те нямат капсули, а образуват микрокапсула.

Метод на Ziehl-Neelsenса боядисани в ярко червено. Съдържат киселинноустойчиви гранули (Fly grains), разположени в цитоплазмата.

Културни свойства на причинителя на туберкулозата

Туберкулозен бацилможе да расте както при аеробни, така и при факултативни анаеробни условия. Повишено съдържание CO 2 (5-10%) насърчава по-бърз растеж. Оптималната температура е 37-38 ° C; pH 7,0-7,2. Те се нуждаят от наличието на протеини, глицерол, растежни фактори (биотин, никотинова киселина, рибофлавин и др.), йони (Mg2+ K+, Na+ Fe2+) и др.

За отглеждане туберкулозни бактериинай-често се използват глицеринова, картофена с жлъчка, яйчена, полусинтетична и синтетична среда. Средата Löwenstein-Jönsen е най-оптимална.

В сряда туберкулозен бацилобикновено образуват R-колонии; под въздействието на антибактериални лекарства бактериите могат да се дисоциират с образуването на меки и влажни S-колонии.

В течна среда туберкулозен бацилобразуват сух набръчкан филм (на 7-10-ия ден), издигащ се до краищата на епруветката; средата остава прозрачна. В течни среди се открива корд факторът - важен диференциален признак на вирулентност. Наличието на кордовия фактор причинява конвергенцията на бактериалните клетки в микроколонии и растежа им под формата на змиевидни плитки.

При растеж на плътни медии туберкулозен бацилотбелязва се на 14-40-ия ден под формата на суха набръчкана плака с жълт, памучно-кремав цвят. Зрелите колонии приличат карфиол, ронливи, слабо намокрени с вода и имат приятна миризма. Културите са слабо отстранени от средата и се напукват при запалване. Отличителна черта M. tuberculosis - способността да синтезира значително количество никотинова киселина (ниацин); Тестът за ниацин е важен метод за диференциация на микобактерии.

Патоген

Mycobacterium tuberculosis - устойчиви на киселина, алкохол и основи микроорганизми. Те са неподвижни, не образуват спори и капсули, нямат флагели. Типичната форма е тънка или леко извита пръчка със заоблени ръбове. В електронния микроскоп всички видове микобактерии изглеждат като пръчки със заоблени ръбове. Въпреки това, често има извити и овални форми. Размерите на клетките могат да варират значително в зависимост от възрастта на културата: дължина от 1,5 до 4 µm, ширина от 0,2 до 0,5 µm. Установена е филогенетичната близост на Mycobacterium tuberculosis с лъчисти гъбички-актиномицети: бавното развитие на микобактериите върху елективни хранителни среди, методът на възпроизвеждане, полиморфизмът и способността при определени условия понякога да образуват нишковидни разклонени форми с издувания с форма на крушка. в краищата. Това е причината името на бацила на Кох да бъде заменено с Mycobacterium tuberculosis (Mus. tuberculosis).

Микобактериите се характеризират с високо съдържание на липиди (от 30,6 до 38,9%), в резултат на което те трудно се оцветяват с анилинови багрила, но възприемат багрилото добре след третиране с карболов фуксин при нагряване. С този метод Mycobacterium tuberculosis запазва багрилата добре и не се обезцветява при излагане на разредени киселини, основи и алкохол, което го отличава от другите микроби. Това е основата на метода за оцветяване на микобактерии по Ziehl-Neelsen.

Микобактериите се оцветяват положително по Грам трудно и придобиват синьо-виолетов цвят.

За бързо откриване на микобактерии в различни обекти има луминесцентен метод, който се основава на способността им да се оцветяват с луминесцентни багрила (родамин-аурамин) и дават златистожълт цвят под въздействието на ултравиолетово лъчение. Методът има висока чувствителност, дава цветен образ на патогена. Изследването се провежда при средно увеличение, което дава възможност да се види по-голямо поле, отколкото при имерсионна микроскопия при голямо увеличение.

Благодарение на електронната микроскопия в микобактериите са открити трислойна клетъчна стена, микрокапсула, цитоплазмена мембрана и др.. Съставът на цитоплазмената мембрана включва липопротеинови комплекси, различни ензимни системи, по-специално тези, отговорни за редокс процесите. Цитоплазмата на микобактериите е представена от гранули, вакуоли и кухини, чийто брой може да се увеличи след излагане на химични агенти.

В микрокултури, развиващи се в течна хранителна среда, микобактериите от човешки и говежди видове образуват плитки, плитки, вихри, клъстери. Микрокултурите се откриват лесно чрез конвенционална микроскопия на петна, оцветени по метода на Ziehl-Neelsen. В препарати, приготвени от първични инокулации, когато се изследват във фазов контраст, обикновено се разграничават хомогенни гранулирани елементи, сред които има сферични светлопречупващи структури.

В култури, изолирани от говеда, по-често се срещат сферични образувания с правилна форма, със същия размер, както и отделно разположени нишковидни структури.

отглеждане

Mycobacterium tuberculosis се възпроизвежда при строго аеробни условия върху специални избирателни хранителни среди, съдържащи съединения на въглерод, азот, водород и кислород, както и магнезий, калий, сяра и фосфор. Солите на желязото и някои други елементи имат стимулиращ ефект върху растежа на туберкулозните микобактерии. Необходимо условие за протичане на биохимичните процеси в микобактериите е създаването на оптимална температура: 37-38°С за човека, 38-39°С за говедата и 39-41°С за птиците. Трябва да се отбележи, че Mycobacterium tuberculosis се характеризира с бавен метаболизъм: растежът на културите се проявява след 15-30 дни или повече, в началото под формата на почти незабележими микроколонии, от които след това се образуват визуално видими макроколонии. През 1887 г. Nocard и Roux откриват глицеринофилност в Mycobacterium tuberculosis. Глицеринът се оказа най-добрият източник на въглерод: добавянето му към месен бульон и агар предизвиква изобилен растеж на културите.

При избора на среда трябва да се вземе предвид нейната цел: за повторно засяване и запазване на субкултури е по-добре да се използват прости среди, съдържащи глицерин (MPGB, глицеринови картофи). За първично изолиране на култури се оправдаха само плътни яйчни среди на Petragnani, Gelberg и др.. За изследване на биохимичните свойства на микобактериите и за други цели е препоръчително да се използват безпротеинови синтетични среди на Soton, Model.

Причинителите на туберкулозата, особено птичия вид, редица атипични и сапрофитни микобактерии, когато растат в течни хранителни среди, образуват както повърхностен, така и дънен растеж с наличието на неравен, набръчкан филм с ронлива консистенция, който има жълтеникав цвят. -кафяв, кремав или кафяв цвят.

Върху плътна среда микобактериите образуват конфлуентни, неравни колонии, които могат да имат гладка, лъскава или грапава повърхност, както и непрекъснато набръчкано покритие от бяло, бяло с жълтеникав оттенък или друг цвят.

Има методи за ускорено култивиране (микрокултивиране) на микобактерии, предложени от редица изследователи (Price, 1941; E. A. Shkolnikova, 1948; N. M. Kolychev, 1970 и др.).

Ценови метод. Намазката върху стъклото се изсушава, след което се инкубира в продължение на 5 минути в 5% стерилен воден разтвор на сярна киселина. Киселината се отмива със стерилна дестилирана вода. Намазката се поставя в течна хранителна среда, в която растежът на микобактериите се появява върху стъклата след 2-6 дни под формата на микрокултури, след като се оцветяват от Ziehl-Neelsen под микроскопия.

Биохимични свойства

Mycobacterium tuberculosis съдържа различни ензими. Ензимите естераза и липаза разграждат мазнините; дехидраза - органични киселини, включително аминокиселини; уреаза - урея, перигалоза - въглехидрати, каталаза - водороден прекис; протеолитични ензими (протеаза) - протеин. Микобактериите ферментират алкохол, глицерол и множество въглехидрати, лецитин, фосфатиди. В младите култури на Mycobacterium tuberculosis, редуциращите свойства са силно изразени, което по-специално се проявява в способността им да възстановяват телурит.

Образуване на токсини. Mycobacterium tuberculosis съдържа ендотоксини - туберкулини (R. Koch, 1890), които проявяват токсичен ефект само в болен организъм. Мастните киселини (маслена, палмитинова, туберкулостеаринова, олеинова) допринасят за разграждането на клетъчните елементи, сирената дегенерация на тъканите, блокират липазата и протеазите, произведени от микобактериите. Вирулентните микобактерии съдържат полизахаридни компоненти, корд фактор, който повишава тяхната вирулентност, освен това корд факторът унищожава митохондриите на клетките на заразен макроорганизъм, нарушавайки процесите на дишане и фосфорилиране.

Антигенна структура

Mycobacterium tuberculosis съдържа полизахарид-протеин-липоиден комплекс, наречен пълен антиген. При парентерално приложение при животни се наблюдава образуване на антитела, които се откриват при серологични реакции - RA, RP, RSK и др.

Туберкулините също са антигени. Отделно никоя от фракциите на Mycobacterium tuberculosis (туберкулопротеини, туберкулолипиди, туберкулополизахариди) не предизвиква имунологични промени в организма. Образуването на антитела причинява само полизахарид-липоиден комплекс, т.е. пълен антиген.

Сред атипичните микобактерии се разграничават общи и групови антигени. За тяхното идентифициране се използват серологични тестове, по-често методът на дифузионно утаяване в агар според Ouchterlony.

устойчивост

Mycobacterium tuberculosis са устойчиви на химически и физични влияния, особено на изсушаване. В изсъхнали храчки, парчета засегната тъкан, прах, микобактерии остават жизнеспособни от 2 до 7 месеца или повече; в течаща вода - повече от година, в почва - до 3 години. Ниските температури не влияят на жизнеспособността на микобактериите.

Микобактериите са много чувствителни към пряка слънчева светлина, в горещи дни те умират в храчките за 1,5-2 часа.Ултравиолетовото лъчение е особено вредно за тях. Високата чувствителност на микобактериите към топлина е от голямо значение в санитарно-профилактичен план. Във влажна среда загиват при 60°C за 1 час, при 65°C - след 15 минути, при 70-80°C - след 5-10 минути. В прясното мляко причинителят на туберкулозата се задържа 9-10 дни, а в киселото мляко загива под въздействието на млечна киселина; в олиото – седмици, а в някои сирена – дори месеци. Mycobacterium tuberculosis е значително по-устойчив на химически дезинфектанти от други неспорообразуващи бактерии; 5% разтвор на фенол и 10% разтвор на лизол унищожават патогена след 24 часа, 4% формалин - след 3 часа.

Като дезинфекционни разтвори за туберкулоза най-ефективни са: 3% алкален разтвор на формалдехид с 3-часова експозиция; 2% (от формалдехид) разтвор на метафора, разтвори на белина, неутрален калциев хипохлорит и суспензии, съдържащи най-малко 5% активен хлор при експозиция от 3 часа; 1% разтвор на глутаралдехид, 8% емулсия на фенозмолин в разход 1 l/m2 и експозиция 3 часа и др.

Патогенност и патогенеза

Патогенност. Говеждият вид микобактерии причинява заболяване при крави, овце, кози, свине, коне, котки, кучета, сърни, елени и др. От лабораторните животни най-податливи са зайците и морските свинчета, които развиват генерализирана туберкулоза.

Птичият вид микобактерии причинява туберкулоза при кокошки, пуйки, токачки, фазани, пауни, гълъби, патици и др. В естествени условия е възможно да се заразят домашни животни (коне, свине, кози, овце, понякога говеда) и дори хора.

От лабораторните животни най-податливи са зайците, по-малко податливи са морските свинчета. Инкубационният период продължава от няколко седмици до няколко години. Доказана е устойчивостта на L-формите, които имат способността да се връщат към типични микобактерии. Наличието на L-форми се счита за причина за рецидив на туберкулоза в здрави стада (В. С. Федосеев, А. Н. Байгазанов, 1987).

патогенеза , Причинителят на туберкулозата, попаднал в тялото по аерогенен, хранителен и друг път, прониква в междуклетъчните пукнатини на лигавицата, където се абсорбира от подвижни полиморфонуклеарни левкоцити (фагоцити) и се разнася в тялото с поток от лимфа или кръв. Възпроизвеждането на Mycobacterium tuberculosis и взаимодействието на макрофагите с тях се извършва главно в тъкани със селективна локализация на туберкулозния процес (лимфни възли, бели дробове, черен дроб и др.). В бъдеще в местата на жизненоважна активност на патогена се образува защитен фокус - туберкул.

Туберкулозните промени в тъканите са възпалителна реакция, която включва процеси на промяна (некроза на част от тъканните елементи), ексудация (излизане от плазмени съдове с формирани елементи) и пролиферация (образуване на съединителна капсула). Туберкулозата се основава на фагоцити. Грудката първоначално има сивкав цвят и заоблена форма; размерът му е от глава на карфица до зърно от леща.

След това възелът е заобиколен от съединителнотъканна капсула. Тъканта във вътрешността на капсулирания възел, поради липсата на приток на хранителни вещества и под въздействието на патогенните токсини, умира и се превръща в суха, ронлива маса, наподобяваща извара (казеоза).

Процесът на образуване на първичния туберкулозен фокус се нарича първичен комплекс. Резултатът от първичния туберкулозен процес може да бъде различен. При висока естествена устойчивост на организма и минимални дози от патогена, лечението на първичния туберкулозен комплекс може да настъпи с едновременното унищожаване на съдържащите се в него микобактерии. Но най-често капсулираните първични огнища се калцират и заедно с туберкулозните микобактерии вътре в тях остават в тялото за дълго време, дори през целия живот.

В организъм с намалена резистентност процесът на капсулиране на патогена в първичния фокус е слабо изразен. Поради недостатъчна регенерация на съединителната тъкан, стените на туберкулозния възел се топят, докато микобактериите навлизат в здрава тъкан, което води до образуването на множество малки възли, които могат да се слеят помежду си, образувайки големи туберкулозни огнища.

Микобактериите от туберкулозни огнища могат да навлязат в кръвта, което води до генерализиране на процеса и развитие на туберкулозни огнища с различни размери в различни органи. На този етап от заболяването се отбелязва неблагоприятен изход от туберкулозна инфекция - изтощение и смърт.

Трябва да се отбележи, че през последните години доста често се наблюдава латентен ход на туберкулозната инфекция, при който патогенът остава дълго време в макроорганизма, но няма специфични туберкулозни промени във вътрешните органи и тъкани.

Съдържанието на статията

Mycobacterium tuberculosis

Причинителите на туберкулозата при хората са M. tuberculosis (повече от 90% от всички случаи на туберкулозна инфекция, M. bovis (5%) и M. africanum (около 3%, главно сред населението на тропическа Африка). туберкулозата е открита от Р. Кох през 1882 г

Морфология и физиология

Mycobacterium tuberculosis - грам-положителни прави или леко извити пръчици. Съставът на микобактериите включва липиди (10-40%), миколни, фтионови, туберкулостеарни и др. мастна киселина. Структурният скелет на клетъчната стена на микобактериите се състои от два ковалентно свързани полимера - арабиногалактазан миколат и пептидогликан, към които са прикрепени протеини, полизахариди и липиди. Такъв сложен химичен комплекс с високо съдържание на липиди придава на клетките на Mycobacterium tuberculosis редица характерни свойства: устойчивост на киселини, основи и алкохол, както и хидрофобност. Методът на Ziehl-Neelsen се използва за оцветяване на туберкулозни бацили. В културите има гранулирани форми, разклонени, зърната на мухата са сферични, киселинно съвместими, лесно се оцветяват по Грам. Възможен е преход към филтрирани и L-форми. Те са неподвижни, не образуват спори и капсули. За култивиране на туберкулозни микобактерии в лабораторни условия се използват специални хранителни среди, съдържащи яйца, глицерин, картофи, аспарагин, витамини и соли. Най-често използваната яйчна среда Lowenstein-Jensen и синтетична среда Soton. Mycobacterium tuberculosis се възпроизвежда бавно. При оптимални условия времето за генериране е около 15 часа, докато бактериите от много други родове се делят на всеки 20-30 минути. Растежът на туберкулозните микобактерии може да се открие след 2-3 седмици и по-късно - до 2-3 месеца, особено в първите поколения. На плътна среда се образуват набръчкани, сухи колонии с неравни ръбове; в течната среда на повърхността се образува деликатен филм, който се удебелява и пада на дъното, докато средата остава прозрачна. За да се постигне по-хомогенен растеж на микобактериите, tween - 80 (повърхностно активно вещество) се добавя към хранителната среда.

Антигени

Антигените на Mycobacterium съдържат протеини, полизахариди, липиди, фосфатиди. Антителата към тях се определят в RSK, RNGA, утаяване в гела. Има общи и специфични антигени в M. tuberculosis, M. bovis и други микобактерии, включително сапрофитни видове.Патогенността на туберкулозните микобактерии е свързана с директен или имунологично медииран увреждащ ефект на липиди (восък D, мурамин дипептид, фтионови киселини), както и туберкулин. Действието им се изразява в развитие на специфични грануломи и увреждане на тъканите. Вирулентните щамове се характеризират с наличието на така наречения корд фактор, гликолипид, състоящ се от трехалоза и димиколат. Разрушава митохондриите на клетките на заразения организъм, като по този начин нарушава дихателната функция. Микобактериите не образуват екзотоксин.

Патогенеза

В зоната на проникване и размножаване на микобактериите възниква специфичен възпалителен фокус - инфекциозен гранулом (първичен ефект). След това конкретна възпалителен процесв регионалните лимфни възли и се наблюдава сенсибилизация на тялото. Така се образува така нареченият първичен туберкулозен комплекс. В по-голямата част от случаите първичният фокус има доброкачествен ход. Отшумява, засегнатата област се калцира и се образува белези. Този процес обаче не завършва с пълното освобождаване на тялото от патогена. Туберкулозните бактерии могат да персистират в първичния фокус и лимфните възли в продължение на много години, понякога през целия живот. Такива хора, оставайки заразени, придобиват имунитет срещу туберкулоза. При неблагоприятни заболявания, особено на фона на лоши социални фактори (недостатъчно и недохранване, лоши жилищни условия, съпътстващи заболявания), може да настъпи активиране на патогена и генерализиране на процеса. Най-честата е белодробната туберкулоза. Генерализиране на инфекцията води до развитие на извънбелодробни форми на туберкулоза: кожата, костите и ставите, бъбреците и други органи. Локализацията на процеса до известна степен зависи от начините на проникване на микобактериите в човешкото тяло и вида на патогена. Патогенетично важно е въздействието на туберкулина върху тялото на заразения човек. За първи път това вещество е получено от Р. Кох през 1890 г., а лекарството, което изучава, се нарича "стар туберкулин". Пречистеният туберкулин (PPD - purified protein derivative) е протеин. Интрадермалното приложение на туберкулин причинява локална възпалителна реакция под формата на инфилтрация и зачервяване (реакция на Манту) при хора, заразени с микобактерии. Неинфектираните хора не реагират на въвеждането на туберкулин. Този тест се използва за идентифициране на заразени, чувствителни хора.

Имунитет

При туберкулоза имунитетът се формира на фона на първична инфекция на тялото с микобактерии, които остават в него дълго време. Тази форма на имунитет се нарича нестерилен и се изразява в устойчивостта на организма към суперинфекция. В допълнение, дълготрайното персистиране на микобактериите в организма е свързано с L-трансформацията на причинителя на туберкулозата, както и с широкото използване на живата авирулентна BCG ваксина за ваксиниране на населението. При туберкулоза се откриват антитела, принадлежащи към различни класове имуноглобулини. Антителата могат да бъдат открити с помощта на различни серологични тестове (RCC, RPGA и др.). Все още не е изяснено значението им за формирането на противотуберкулозен имунитет. Смята се, че антителата срещу Mycobacterium tuberculosis са само "свидетели" на имунитета, нямат инхибиторен ефект върху патогена и не отразяват неговата интензивност. Голямо значениеима клетъчен имунитет. Индикаторите за неговите промени, съдейки по реакцията на бластна трансформация на лимфоцитите, цитотоксичния ефект на лимфоцитите върху целевите клетки, съдържащи микобактериални антигени, тежестта на реакцията на инхибиране на миграцията на макрофагите са адекватни на хода на заболяването. Т-лимфоцитите след контакт с антигени на микобактерии произвеждат имуноцитокини, които повишават фагоцитната активност на макрофагите. При потискане на функцията на Т-лимфоцитите туберкулозният процес протича в по-тежка форма. Фагоцитозата при туберкулоза е непълна, тъй като микобактериите могат да се размножават в макрофагите и частично да ги унищожат. Запазването на живи микобактерии в тъканите осигурява повишена устойчивост на суперинфекция, както и "имунологична памет". Алергията, която се развива според вида на ХЗТ, е важна за формирането на имунитет при туберкулоза. Защитната роля на ХЗТ се проявява в ограничаване на възпроизводството на микобактерии, тяхното фиксиране в огнищата на инфекцията, образуването на инфекциозни грануломи с участието на Т-лимфоцити, макрофаги и други клетки.

Екология и епидемиология

В естествени условия M. tuberculosis живеят в тялото на своите гостоприемници - хора и някои животни (говеда, свине). M. africanum причинява туберкулоза при хората в Субсахарска Африка. По този начин болните хора и животни са източник на инфекция. При активна туберкулоза с наличие на възпалителни и деструктивни промени те отделят микобактерии в околната среда. Повече от 80% от населението е заразено с Mycobacterium tuberculosis в ранна възраст. Най-честият въздушно-капков път на инфекция, при който патогенът навлиза в тялото през горните дихателни пътища, понякога през лигавиците на храносмилателния тракт или през увредена кожа. Попадайки в околната среда, Mycobacterium tuberculosis запазват своята жизнеспособност за дълго време. И така, в изсъхнали храчки те оцеляват няколко седмици, върху предмети около пациента (бельо, книги) - повече от 3 месеца, във вода - повече от година, в почва - до 6 месеца и се съхраняват дълго време в млечни продукти. Mycobacterium tuberculosis е по-устойчив на действието на дезинфектанти от други бактерии, за тяхното унищожаване са необходими по-високи концентрации и по-дълго време на експозиция. При варене умират моментално, чувствителни са към пряка слънчева светлина.

Туберкулоза

Туберкулоза- първично хронично инфекциозно заболяване на хората и животните, което се причинява от патогенни микобактерии. В зависимост от локализацията на лезията се изолира туберкулоза на белите дробове, кожата, лимфните възли, менингите, костите и ставите, пикочно-половата система и коремната кухина. Съвременният период се характеризира с нарастване на заболеваемостта, тежко протичане, увеличаване на смъртността и появата на значителен брой щамове, резистентни към много противотуберкулозни лекарства.В Украйна туберкулозата при хората най-често се причинява от Mycobacterium tuberculosis MI . бовис. Много рядко това заболяване се причинява от avium. В страните от Африка, Америка и други континенти заболявания, подобни на туберкулозата, се причиняват от M. africanum, M. asiaticum, M. kansasii, M. fortuitum, M. ulcerans и др. Тези заболявания се наричат микобактериози. Друг представител на рода микобактерии - M leprae - е причинителят на проказата. Общо има повече от 40 вида микобактерии, 24 от тях са патогенни и потенциално патогенни.Лабораторната диагностика на туберкулозата и микобактериите включва микроскопски, бактериологични, биологични, серологични изследвания и алергични тестове. Основният метод е изолирането на чиста култура на патогена, неговата идентификация и определяне на чувствителността към антимикробни лекарства.

Вземане на материал за изследване

Патологичният материал е храчка, слуз от задната част на фаринкса, плеврален ексудат, гной, гръбначно-мозъчна течност, промивки от бронхите и стомаха, урина, изпражнения, точки, по-рядко кръв и др. Пациентът събира храчки в буркан или джобен плювалник . Най-добри резултати се получават при изследване на храчки, събрани в рамките на 12 - 24 часа. Други материали се събират в стерилни буркани или епруветки. Залепват етикет с името и инициалите на пациента, групата за диспансерна регистрация, целта на изследването и го изпращат в лабораторията. Събраният клиничен материал се счита за потенциално патогенен.

Бактериоскопски метод

Натривките се правят директно от храчка или седимент, получен след центрофугиране на хомогенизиран материал. Храчките се прехвърлят в петриево блюдо, поставено на тъмен фон. С помощта на пинсети се избират мукопурулентни ухапвания, прехвърлят се в средата на предметното стъкло, покриват се с второ предметно стъкло и се разтриват между предметните стъкла. Приготвят и цитонамазки от тор и пунктати. Гръбначно-мозъчната течност се съхранява 18-20 часа в хладилник, а образуваната нежна фибринова мрежа се разстила внимателно върху предметно стъкло. Урината се центрофугира и от утайката се правят цитонамазки. Именно тези петна се обезцветяват не само с киселина, но и със спирт, за да се разграничат туберкулозните бактерии от M. smegmatis, които могат да бъдат намерени в урината на здрави хора. В препарати, оцветени по Ziehl-Neelsen, причинителят на туберкулозата има формата на тънки твърди рубинено-червени пръчици, разположени поотделно или на групи, главно извън клетките, солен алкохол и отново се измиват добре с вода. Ако фонът на намазката има силна флуоресценция по време на микроскопия, е необходимо да се охлади до известна степен с 0,25% воден разтвор на метиленово синьо, да се изплакне с вода, да се изсуши и да се изследва под флуоресцентен микроскоп. Туберкулозните бацили светят със златиста светлина на тъмнозелен фон. Като флуорохроми се използват също аурамин, акридин оранжев и др.. За откриване на L-форми на микобактерии се използва главно фазово-контрастна микроскопия. Отрицателният резултат от микроскопията не дава право да се изключи диагнозата.Съществен недостатък на бактериоскопския метод е неговата ниска чувствителност: микобактериите могат да бъдат открити в намазка само ако има 50-100 хиляди микробни тела в 1 ml патологичен материал. В допълнение, този метод не може да разграничи причинителя на туберкулозата от други микобактерии и да определи неговата чувствителност към химиотерапевтични лекарства. За да се увеличи честотата на откриване на Mycobacterium tuberculosis в тестовия материал (особено в храчката), се използват методи за обогатяване - хомогенизация и флотация.

Метод на хомогенизиране

Дневната част от храчките се въвежда във флакона, добавя се равен обем 1% разтвор на NaOH, плътно се затваря с гумена запушалка и се разклаща в апарат за совалка в продължение на 10-15 минути до пълно втечняване. Хомогенизираната течност се центрофугира, декантата се излива в разтвор на хлорамин, утайката се неутрализира с 2-3 капки 10% или 30% разтвор на солна киселина. оцетна киселина. Приготвят се натривки от утайката, оцветяват се по Ziehl-Neelsen и се микроскопират.

Метод на флотация

Част от храчката (10-15 ml) се хомогенизира, както е описано по-горе. Конус или флакон с разреден материал се поставя във водна баня при 55 ° C за 30 минути, след това се добавя 0,5-1 ml ксилен (бензен, бензин, толуол), разклаща се за 10 минути и се оставя да престои половин час . Ксилолът, заедно с адсорбираните микобактерии, изплува на повърхността и образува горноподобен слой. Допълнете с дестилирана вода, така че този слой да се издигне в гърлото на колбата или флакона. Със стерилна пипета на Пастьор част от ксилените на слоя се прехвърлят върху предметно стъкло, загрято върху стъклена плака, разположена на водна баня при температура 60 ° C. Изсушената намазка се покрива с нова порция горен подобен материал, изсушава се отново и се повтаря, докато целият флотационен слой се прехвърли в намазка. Препаратът се промива с етер, суши се, фиксира се със суха топлина, оцветява се по Ziehl-Neelsen и се изследва под микроскоп. Методите на хомогенизиране и флотация повишават присъствието на Mycobacterium tuberculosis в тестовия материал с 10%. В същото време те могат да бъдат открити, ако има повече от хиляда микробни тела в 1 ml храчка.Промивната вода на бронхите и стомаха може да се изследва за допълнителна хомогенизация или флотация.

Бактериологичен диагностичен метод

Бактериологичният диагностичен метод е много по-ефективен от бактериологичния метод. Позволява ви да идентифицирате 20-100 или повече микобактерии в 1 ml от тестовия материал. Използва се не само за диагностициране на заболяването, но и за проследяване на ефективността на химиотерапията, определяне на вирулентността и резистентността на микобактериите към антибиотици и други противотуберкулозни лекарства, идентифициране на променени варианти, особено L-форми.Почти всички изследвани материали са от пациентите с туберкулоза (с изключение на кръвта, цереброспиналната течност) съдържат съпътстваща микрофлора. Поради това е невъзможно да се изолира чиста култура от микобактерии без тяхната предварителна обработка. За унищожаване на чужди микроорганизми, храчки, гной, промивни води и други материали се третират в продължение на 20 минути при стайна температура с двоен обем от 6% разтвор на сярна киселина или 10% разтвор на тринатриев фосфат при 37 ° C в продължение на 18-20 часа. След това обработеният материал се центрофугира, течната част се отцежда и утайката се неутрализира чрез добавяне на 1-2 капки 3% разтвор на NaOH или се промива три пъти от киселина с изотоничен разтвор на натриев хлорид нишесте с глицерин, соли, яйчена суспензия и малахитово зелено) и Finna-2, който има същия състав като предишния, но в него аспарагинът е заменен с натриев глутамат. Тези среди се препоръчват от СЗО като стандарт във всички страни по света за първично култивиране на Mycobacterium tuberculosis и определяне на тяхната резистентност към химиотерапевтични лекарства. За други нужди можете да използвате глицеринов бульон, среда Petragnani, Pavlovsky, Soton.Цереброспиналната течност, ексудатът, кръвта, пунктатът се пипетират върху хранителна среда без предварителна обработка. Всички памучни тапи се отрязват на нивото на краищата на епруветката, избутват се навътре с 1-1,5 cm и се заливат с разтопен парафин, за да се предотврати изсъхването на средата.Инокулираните епруветки се инкубират в термостат при 37 ° C за 3-4 седмици. Тези епруветки със среди, върху които материалите са засети с примка и втрити в повърхността на агара, се поставят вертикално. Ако инокулацията е извършена с пипета на Пастьор, епруветките се поставят в термостат в наклонено положение за 2-3 дни, след това вертикално. Посевите се преглеждат на всеки 5-7 дни. Всички епруветки с ранен растеж на чужда микрофлора се отстраняват. При ранен растеж на характерни колонии (преди 5-ия ден) се прави заключение за наличие на бързорастящи микобактерии, т.е. отрицателен отговор за туберкулоза. Растежът на туберкулозните бактерии най-често се появява след 3 седмици, но има случаи след 2-3 месеца. Груби, груби, сухи, непигментирани колонии растат върху плътна среда, имаща набръчкана повърхност, удебелен център и тънки, неравни ръбове. На външен вид приличат на резенчета карфиол или брадавици.Това са типични R-образни колонии, характерни за патогенните щамове. S-образни колонии от жълт или оранжев цвят, като правило, са характерни за други видове микобактерии. Но под въздействието на антибактериални лекарства M tuberculosis може също да образува меки, влажни, пигментирани S-образни колонии. Необходимо е да се отбележи скоростта и изобилието на растеж.Много по-рядко тестовият материал се засява върху глицеринов бульон, течна среда с кръвна плазма, говежди серум или синтетична среда на Soton. На тях mycobacterium tuberculosis расте малко по-бързо, изглежда като деликатен филм, който с времето се сгъстява, загрубява, става крехък и се утаява. От течни среди засяването се извършва в епруветки с плътна среда, което увеличава броя на положителните резултати, но изследванията отнемат повече време. , цетавлон и др.). В същото време хомогенизирането на материала се подобрява, центрофугирането е изключено и колониите са по-склонни да растат.

Методи за ускорено култивиране

За да се постигне много по-бърз растеж на Mycobacterium tuberculosis, се предлагат методите на микрокултурите на Прайс и ученици. Методът на Price се състои в това, че храчки, гной, утайка от урина, измивки и други материали се нанасят в дебел слой върху няколко тесни предметни стъкла (обикновените предметни стъкла се нарязват наполовина по дължина). Изсушените петна се вземат със стерилни пинсети и се потапят за 15-20 минути в епруветки с 2% разтвор на сярна киселина и след това се промиват три пъти със стерилен разтвор на натриев хлорид, за да се отстрани киселината. След това лекарството се поставя в епруветки или флакони с течна среда на Soton или цитратна кръв. Намазката трябва да бъде напълно покрита с хранителна среда. За потискане на външната микрофлора, която понякога може да остане след киселинно третиране на петна, към средата се добавят 10 IU / ml пеницилин. Културите се отглеждат в термостат при 37-38 ° C. След 3-4 дни слайдовете с петна се отстраняват, фиксират със суха топлина, оцветяват се с Ziehl-Neelsen или родамин и се микроскопират. Вирулентните микрокултури в препаратите образуват снопчета или изкривявания, които се образуват под въздействието на корд фактора.Максималният растеж на микрокултурите се наблюдава на 7-10 ден.Дълбоко култивиране на микобактерии в хемолизирана кръв по метода, промит с 0,85% натриев хлорид разтвор. След 6-8 дни култивиране културата се центрофугира, правят се намазки от утайката, оцветяват се по метода на Ziehl-Neelsen или флуорохром и се микроскопират. В препаратите се откриват типични микрокултури с характерно разположение под формата на плитки и снопове. За идентифициране на L-форми на Mycobacterium tuberculosis, инокулацията на материала след подходящо третиране с киселина се извършва в специална полутечна среда, излята в епруветки под формата на колона. Растеж при 3 7 ° C за 1-2 месеца. Растежът на L-формите прилича на облак със същите малки включвания, подобни на грис. Направените петна се изследват под фазово-контрастен микроскоп, с чрез силата на които G-формите на различни морфологии се откриват по-добре. те могат също да бъдат открити чрез последователни пасажи върху морски свинчета или чрез използване на имунофлуоресцентен метод, като се използват серуми, съдържащи маркирани антитела срещу антигени на L-формата.Много признаци се използват за идентифициране на изолирани култури от туберкулозни патогени и за разграничаване от други видове микобактерии. Основните са вирулентност, скорост на растеж, форма на колония, образуване на пигменти, каталаза, уреаза, никотинамидаза, нитратредуктаза. Най-важната характеристика на M tuberculosis е ниацин тестът - способността да се синтезира значително количество никотинова киселина (ниацин). Активността на каталазата е сравнително слаба и се губи при 68 ° C. За бързо диференциране на причинителите на човешката туберкулоза се препоръчва да се инокулира върху среда на Lowenstein-Jensen с 500 μg / ml и 1000 μg / ml салицилов натрий. Mycobacterium tuberculosis при такива условия не расте в тази среда.Въпросът за вирулентността на микобактериите се решава въз основа на биологични проби и откриване на фактора на кабела. Последното се определя по метода на микрокултурата на Прайс, както и на базата на силно свързване на багрила като неутрално червено или нилско синьо. Когато се прилагат върху намазка с разтвор на NaOH, туберкулозните бацили запазват цвета на багрилото, докато невирулентните микобактерии променят съответния цвят.За надеждна идентификация на видовете микобактерии в съвременни условияса разработени прогресивни, бързи и много точни методи за определяне на такива тестови материали като храчки, плеврална течност, течност, гной, кръвен серум, стомашно съдържимо, тъкани и др. Тези обекти, дезинфекцирани чрез нагряване, се съхраняват за неопределено време и по всяко време могат да бъдат изследвани. Сред тях най-голямо внимание заслужава молекулярно-генетичният метод на полимеразна верижна реакция. Основава се на откриването на ДНК на микобактерии в биологичен материал. Дори ако в материала има само 5-10 микробни клетки, олигонуклеотидните праймери започват синтеза на специфични ДНК фрагменти в циклотермостата, които след това могат да бъдат идентифицирани чрез гел електрофореза. Резултатите от изследванията се получават след 3-4 часа.Специфични антигени в същите материали могат да бъдат открити бързо и чрез ензимен имуноанализ, ако имате подходящите антитела, адсорбирани върху твърдата фаза в полистиренови плаки.

Определяне на резистентност на микобактерии към химиотерапевтични лекарства

Лекарствената резистентност на туберкулозните патогени се определя чрез метода на серийни разреждания преди началото на лечението, след 3 месеца и в бъдеще, с продължаващо изолиране на туберкулозни бацили на всеки 6 месеца. Това става чрез отглеждане на култури върху среди с различни концентрации на туберкулостатици.Има два начина за определяне на резистентността на микобактериите: директен и индиректен. При директния метод, съответно обработеният материал се засява директно върху среди с различни концентрации на антибиотици или други химиотерапевтични лекарства. Той е ефективен, но може да се използва само когато се открият най-малко 5 микобактерии в материала във всяко зрително поле. С индиректен метод, предварително изолирани култури от микобактерии се засяват върху среда с противотуберкулозни лекарства. И в двата случая е необходим контрол - засяване на една и съща среда без туберкулостатици.В съвременните условия най-често се използват следните методи за определяне на лекарствената резистентност на микобактериите: 1) култивиране върху плътна среда Levenpgein-Jensen; среда.В епруветки съдържащи различни концентрации на лекарства, като в една контрола (без туберкулостатици) се посява суспензия от изолираната култура (500 милиона микробни тела в 1 ml). Една култура се счита за чувствителна, ако в епруветката с лекарството са израснали по-малко от 20 колонии, с обилен растеж в контролата. Ако са израснали повече от 20 колонии, културата се счита за стабилна. Устойчивостта на този щам се изразява в максималната концентрация на антибактериалния препарат, при която все още има растеж, близка до тази в контролата.

биологичен метод

Чувствителен е биологичният метод за диагностициране на туберкулоза - заразяване на морски свинчета. Инфекциозната доза на патогена за тези животни е само няколко бактериални клетки. Тестовият материал се обработва с 2% разтвор на сярна киселина в продължение на 20 минути, включително центрофугиране. След това утайката се промива три пъти с 0,85% разтвор на натриев хлорид и се емулгира в 1-2 ml изотоничен разтвор. Емулгираният седимент се инжектира подкожно в ингвиналната област на две морски свинчета с тегло 250-300 g с отрицателна проба Манту. С малко количество материал се инжектира в коремната кухина или паренхима на тестисите. Този метод на инфекция повишава чувствителността на биотеста, особено в случаите, когато материалът съдържа нисковирулентни туберкулозни бацили, които са резистентни към изониазид и други химиотерапевтични лекарства.След 2-3 седмици заразените животни се претеглят, размерът на увеличените определят се лимфни възли и се прави проба Манту, която се повтаря след 6 седмици. Локалните патологични промени, намаляването на телесното тегло дават основание за отваряне на морски свинчета и тяхното изследване. вътрешни органи. При отрицателни резултати след 3-4 месеца животните се умъртвяват, хистологично се изследват паренхимните органи и се правят посявки на елективни среди.Използват се и морски свинчета за откриване на L-форми на Mycobacterium tuberculosis. В такива случаи е необходимо да се направят няколко последователни инфекции, тъй като L-формите имат по-ниска вирулентност и причиняват доброкачествен ход на туберкулозата при животните, с реверсия на L-формите може да се превърне в генерализиран процес. все по-често се използва биотест върху бели мишки, инфектиращи ги интрацеребрално. Поставянето на биологични проби върху лабораторни животни е един вид "златен стандарт" в диагностиката на туберкулозата.

Серологична диагностика

За откриване на антитуберкулозни антитела първоначално бяха предложени реакции на аглутинация, утаяване и свързване на комплемента. Сега те се използват рядко. Но те започнаха широко да практикуват реакцията на непряка хемаглутинация. Като антиген той използва сенсибилизирани еритроцити на овца или човек от О-групата. те са заредени с екстракт от туберкулозни бактерии или пречистен туберкулин. Към 1 ml еритроцитна утайка се добавят 20 ml екстракт от микобактерии, държи се при 37 ° C в продължение на 2 часа и се отмива чрез центрофугиране, за да се отстрани излишният антиген. Преди да се настрои RNHA, серумът на пациента се изчерпва с еритроцитна маса, за да се елиминира неспецифичният отговор. След това серумът се разрежда от 1:2 до 1:272. Разреждане 1:8 се счита за диагностичен титър. При туберкулоза RNHA е положителен в 70-90% от случаите.Добри резултати се получават и чрез ензимен имуноанализ, имуноблотинг и реакцията на агрегат-хемаглутинация за определяне на циркулиращи имунни комплекси. Още по-точно, съществува радиоимунен метод, но поради високата цена на диагностиката и липсата на радиометрично оборудване, той рядко се използва в лечебните заведения.За подобряване на серологичната диагностика на туберкулозата е важно да се установи производството на моноклонални антитела към различни антигени на микобактерии. С тяхна помощ би било възможно да се идентифицират специфични епитопи на бактерии, както и съответните им антитела. Откриването на такива антитела ще бъде от голяма диагностична стойност.

Алергичен метод

Интрадермалният туберкулинов тест на Манту е специфичен диагностичен тест. Използва се за определяне на инфекцията на населението с туберкулоза, масов скрининг за туберкулоза на деца и юноши, подбор на лица, които трябва да бъдат реваксинирани, за проверка на нейната ефективност, както и за диагностициране на туберкулоза и определяне на активността на процеса. , За изследване се използва туберкулин. През 1890 г. Робърт Кох предлага първото лекарство, така наречения стар туберкулин на Кох (Alttuberkulin Koch или ATK). Произвежда се от смес от култури от човешки и говежди микобактерии, отглеждани в глицеринов бульон в продължение на 5-6 седмици. Културата се стерилизира с течаща пара 30 минути, изпарява се при 70 ° С до 1 10 от първоначалния обем, филтрува се през бактериален филтър и се изсипва в ампули. Tuberculin Koch съдържа редица баластни вещества и трудно се стандартизира. В началото на 1934 г. Seibert предлага високо пречистен туберкулинов препарат за производство на алергични тестове, който се нарича PPD-S (Purified protein derivative - Seibert). След 5 години М.А. Линников произвежда пречистен туберкулин, наречен PPD-L. Дозира се в туберкулинови единици (ТО). 1 TO съдържа 0,00006 mg сух препарат. PPD-L се произвежда в две форми: сух пречистен туберкулин 50 000 TO в ампули и PPD-L в стандартно разреждане в 3 ml ампули. 0,1 ml от разтвора съдържа една доза (2 IU) Лекарството се прилага интрадермално с еднограмова туберкулинова спринцовка в обем 0,1 ml в средната трета на предмишницата. Преди инжектиране кожата се избърсва със 70% алкохол. Тънка игла с разрез се вкарва в повърхностния слой на кожата под ъгъл 15 ° спрямо повърхността й. Резултатите от алергичния тест се оценяват след 72 часа по следната схема: отрицателен тест - пълно отсъствиепапули; съмнително - папула с размер 2-4 mm или само хиперемия с всякакъв размер; положителна - папула с диаметър 5 mm и повече хиперергична - при деца и юноши, папула с диаметър 17 mm или повече, при възрастни - 21 mm или повече.

Профилактика и лечение

За специфична профилактика се използва жива BCG ваксина - BCG (Bacille Calmette-Guerin). Щамът BCG е селекциониран от A. Calmette и C. Guerin чрез дълготраен пасаж на бактерии от туберкулоза по говедата (M.bovis) върху картофено-глицеринова среда с добавяне на жлъчка. Те направиха 230 пасажа за 13 години и изолираха мутант с намалена вирулентност. У нас всички новородени се ваксинират срещу туберкулоза на 5-7-ия ден от живота. Реваксинацията се извършва на лица с отрицателна туберкулинова проба с интервал от 5-7 години до 30-годишна възраст. Това създава инфекциозен имунитет със свръхчувствителност от забавен тип. За лечение на туберкулоза се използват антибиотици и химиотерапевтични лекарства, към които патогените са чувствителни. Това са лекарства от първа линия: дехидрострептомицин, PASK и GINK (хидразиди на изоникотинова киселина - изониазид, тубазид, фтивазид) и втора линия: етионамид, циклосерин, канамицин и др. Във връзка с настоящото разпространение на резистентни към лекарства щамове на микобактерии туберкулоза туберкулоза предложи нова класификация на противотуберкулозните лекарства: I ред - най-ефективни (изониазид и рифампицин), II ред - лекарства със средна ефективност (етамбутол, стрептомицин, етионамид, пиразинамид, канамицин, циклосерин), III ред - малки анти -лекарства за туберкулоза (ПАСК и тибон). Комплексът от терапевтични мерки използва десенсибилизираща терапия и стимулиране на естествените защитни механизми на организма.

Представителите на семейство Mycobacterium Mycobacteriaceae имат вид на тънки, понякога разклонени пръчици, които приличат на гъба. Бавният растеж върху хранителни среди също ги доближава до гъбите. Тези характеристики обясняват името на семейството, рода - Mycobacterium.

Микобактериите са киселинно-алкални и алкохолоустойчиви, което се дължи на наличието на мастни вещества в клетъчните им мембрани.

Родът на микобактериите включва патогенни и непатогенни представители. Причинителите на туберкулозата и причинителят на проказата са патогенни за човека.

Туберкулозата е широко разпространена сред животни, птици, гризачи.

Има няколко вида туберкулозни бацили:

1. Човек - Mycobacterium tuberculosis

2. Говеда - Mycobacterium bovis

3. Птичи - Mycobacterium avium

4. Мишка - Mycobacterium murium

5. Има микобактерии, които причиняват заболявания при хладнокръвните животни. Те включват специална група атипични микобактерии.

В момента атипичните микобактерии са от особено значение. Те се разделят по редица признаци на 4 групи: I, II, III, IV (по Runyon). Те се различават от Mycobacterium tuberculosis по по-ниските си изисквания към хранителните среди. Помежду си те се различават по отношение на хранителните среди, скоростта на растеж, способността да образуват пигмент, както и каталазната и пероксидазната активност. Представителите на група I и III причиняват заболявания при хората.

Морфология. До реката са открити причинителите на туберкулозата. Koch през 1882 г. Това са тънки пръчици с размери 1,5-4 × 0,3-0,5 µm. Те са много полиморфни: има прави, извити, конусовидни. В резултат на променливостта на бактериите има устойчиви на киселини форми и много малки, така наречените Fly grains. Разнообразието от форми често зависи от състава на средата, въздействието на антибиотиците и химиотерапевтичните средства върху тях. Туберкулозните бактерии са неподвижни, нямат спори и капсули. Грам-положителни, но те не възприемат добре анилиновите багрила. Те са добре оцветени в червено по метода на Ziehl-Nielsen (виж фиг. 4), където се използват концентрирани бои и ецване.

отглеждане. Причинителите на туберкулозата са аероби. Те растат при температура 37-38 ° C и рН 5,8-7,0 Отличителни културни характеристики на туберкулозния бацил са бавен растеж и взискателност към хранителни среди. Преди всичко те растат само на специални среди: среда на Петраняни, Петров, Левенщайн-Йенсен. Те могат да се отглеждат върху глицеринов бульон, глицеринов агар, глицеринови картофи. Глицеринът стимулира растежа на микобактериите. M. bovis не се нуждае от глицерол. Най-широко използваната среда е Loewenstein-Jensen, която се препоръчва от СЗО като стандартна среда за отглеждане на туберкулозни бацили. Понастоящем се използва и среда Finn II, която се различава от средата на Lowenstein-Jensen по това, че вместо аспарагин се използва натриев глутамин. В тази среда Mycobacterium tuberculosis расте малко по-бързо, отколкото в средата на Lowenstein-Jensen, и процентът на изолиране на културите е по-висок. Туберкулозните бацили могат да се култивират и върху синтетични среди, като например средата на Сотон.

Mycobacterium tuberculosis се среща в R- и S-форма. R-формата е по-вирулентна (M. bovis е по-често срещана в R-формата). Върху гъста хранителна среда туберкулозните патогени образуват сухи набръчкани кремави колонии с леко повдигнат център и назъбени ръбове (виж фиг. 26). В течни хранителни среди Mycobacterium tuberculosis расте на 10-15-ия ден под формата на филм, който постепенно се удебелява, става грапав, набръчкан, крехък и понякога пада на дъното поради гравитацията. Бульонът под филма остава прозрачен.

Ензимни свойства. Причинителите на туберкулозата не са биохимично активни. Откриха протеолитичен ензим, който при определени условия (киселинна и алкална среда) разгражда протеина. Те също така разграждат някои въглехидрати, образуват уреаза. Но тези свойства не са постоянни. Следователно изследването на ензимите няма диагностична стойност.

образуване на токсини. Причинителите на туберкулозата образуват ендотоксин - това протеиново вещество е изолирано за първи път от R. Koch (1890) и го нарича туберкулин. "Старият" туберкулин е културална течност, получена чрез отглеждане на култура в глицеринов бульон и изпарена при 70 ° C до 1/10 от първоначалния й обем. „Новият“ туберкулин е пречистено протеиново производно на туберкулин.

Туберкулинът има свойствата на алерген. Няма токсичен ефект върху здравия организъм. Действието му се проявява само в заразен организъм. Следователно, въвеждането на туберкулин се използва за диагностични цели, при производството на алергични тестове (Pirquet или Mantoux). За тази цел туберкулинът се приготвя от говежди тип Mycobacterium tuberculosis.

Вирулентните щамове на туберкулозни патогени съдържат специален липиден кордов фактор, който насърчава адхезията на микобактериите и растежа им под формата на плитки и нишки.

Антигенна структура. Mycobacterium tuberculosis съдържа антиген, който включва протеинови, липоидни и полизахаридни фактори. Този антиген предизвиква производството на антитела в организма (аглутинини, преципитини, комплементфиксиращи вещества и др.). Тези антитела обаче се намират в ниски концентрации, така че рядко се използват за диагностични цели.

Устойчивост на околната среда. Mycobacterium tuberculosis е най-стабилната от неспорообразуващите форми на бактерии (резистентността се дължи на наличието на липиди в тяхната обвивка). Те издържат на температура от 100°C за 5 минути. UV лъчите причиняват смъртта им само след няколко часа.

В изсъхнали храчки те живеят до 10 месеца. При ниски температури Mycobacterium tuberculosis продължава дълго време.

Дезинфекционни разтвори: сублимат (1: 1000), карболова киселина (5%) ги унищожават само след ден. Най-чувствителни са към хлорамин и белина.

Възприемчивост на животните. Човек е много чувствителен към M. tuberculosis, животните и птиците са нечувствителни. От опитните животни силно чувствителни към него са морските свинчета, при които инфекцията протича генерализирано и обикновено завършва със смърт на животното.

Едрият и дребен добитък и домашните животни са възприемчиви към M. bovis (човекът е нечувствителен, но децата могат да се заразят при употреба на мляко от болни животни).

От опитните животни най-чувствителни са зайците, при които инфекцията протича генерализирано. M. avium причинява болести при птици: кокошки, гълъби, фазани и др. Но някои животни също могат да се разболеят (човек рядко се заразява).

От опитните животни чувствителни са зайците. Имат остра инфекция.

Видът мишка е патогенен предимно за полевки. При зайци и морски свинчета заболяването протича в хронична форма.

Източници на инфекция. Човек. Рядко животни.

Пътища на предаване. Най-честите пътища на предаване са въздушно-капков и въздушно-капков; по-малко храна. Може би вътрематочна инфекция през плацентата.

Болести при човека и патогенеза. Туберкулозата се характеризира с различни клинични форми. Има белодробна (най-често) и извънбелодробна форма: туберкулоза на стомаха и червата, бъбреците, мозъчните обвивки, костите и други органи.

Всяка от тези форми може да завърши с обобщение на процеса. При въздушно-капкова и въздушно-прахова инфекция основният фокус се появява в белия дроб. В засегнатия орган се образува туберкулоза - tubercul. Туберкулозата е натрупване на левкоцити и гигантски клетки, вътре в които са Mycobacterium tuberculosis. При добра устойчивост на тялото съединителната тъкан обгражда туберкулозата, калцира се и бактериите, оставайки жизнеспособни, не излизат извън туберкулозата. Такъв е "центърът на Гон" - калцифициран, малък фокус на мястото на първичното въвеждане на туберкулозния бацил (затворен процес).

При затворен процес туберкулозните бацили не се екскретират с храчки, урина и др.

По този начин, дори и при доброкачествен ход на процеса, тялото не се освобождава от туберкулозни патогени. Смята се, че 80% от хората са заразени с туберкулозни бактерии. Те обаче са клинично здрави. Когато тялото влезе неблагоприятни условия, неговите защитни функции са намалени, туберкулът претърпява некроза, бактериите се освобождават и включват нови области в процеса, настъпва обостряне, образуват се каверни - отворен процес. Понякога може да има генерализиране на процеса, което води тялото до смърт. По-често туберкулозата протича в хронична форма (затворен процес). Условията на труд и живот са от голямо значение по време на обостряне.

Имунитет. Човек има определена устойчивост, т.е. при заразяване не винаги възниква заболяване, но се формира инфекциозен (нестерилен) имунитет, който се определя от комплекс от защитни фактори: хуморални, клетъчни, както и резистентност. на органи и тъкани.

Предотвратяване. Ранна диагностика, изолация и др. За специфична профилактика се използва живата БЦЖ ваксина (БЦЖ), получена от френските учени Calmette и Guérin. Тази ваксина се прилага на новородени еднократно, интрадермално във външната повърхност на рамото. Реваксинацията се извършва след 7-12 години, а след това на всеки 5-6 години до 30 години.

Лечение. Антибактериални лекарства: стрептомицин, рифампицин, PAS, фтивазид и др.

тестови въпроси

1. От кого и кога е открит причинителят на туберкулозата?

2. На какви видове се делят туберкулозните бацили? Какъв вид е патогенен за хората?

3. Какво определя резистентността на Mycobacterium tuberculosis?

4. Какъв метод се използва за оцветяване на петна за откриване на туберкулозни микобактерии?

5. В какви форми се разделят Mycobacterium tuberculosis и каква форма е патогенна?

Микробиологични изследвания

Целта на изследването: идентифициране на патогена.

Изследователски материал

1. Храчки (туберкулоза на белите дробове и бронхите).

2. Ексудат от плевралната кухина (белодробна туберкулоза, плеврата).

3. Асцитна течност и изпражнения (чревна форма на туберкулоза).

4. Урина (бъбречна туберкулоза).

5. Цереброспинална течност (туберкулозен менингит).

6. Кръв (генерализация на процеса).

Забележка. Бурканите за събиране на материал трябва да са с винтови капачки. Съдовете за събиране на материал се стерилизират в автоклав при 120°С за 20 минути или чрез кипене за 1 час.

Основни методи на изследване

1. Бактериоскопски.

2. Луминесцентни.

3. Бактериологичен

4. Биологичен.

5. Алергичен.

тестови въпроси

1. На какви хранителни среди се отглеждат туберкулозните микобактерии и каква е продължителността на растежа им?

2. Как и защо се третира храчката преди засяването й върху хранителни среди?

3. Опишете растежа на туберкулозен бацил върху твърди и течни хранителни среди.

4. Кое животно е най-чувствително към човешкия тип туберкулозен бацил?

Хранителни среди

среда Levenshtein-Jensen: физиологичен разтвор; монозаместен калиев фосфат - 2,4 g; магнезиев сулфат - 0,24 g; магнезиев цитрат 10,6 g; аспарагин - 3,6 g; глицерин - 12 ml; картофено брашно - 5 g; дестилирана вода - 600 мл.

Реактивите се разтварят в указаната последователност при слабо нагряване и се стерилизират 2 часа на течаща пара. Солената основа може да се приготви с марж от 3-4 седмици.

яйчна маса. 24-27 (в зависимост от размера) пресни диетични яйца се измиват с течаща топла вода, четка със сапун, потапят се в 70% спирт за 30 минути, след което се счупват върху спиртна лампа в кутия със стерилна пинсета в колба с мъниста, разбъркайте добре и на 1 л яйчена маса добавете 600 мл физиологичен разтвор. Сместа се филтрира през марлен филтър, добавят се 20 ml стерилен 2% разтвор на малахитово зелено и се налива в епруветки от 5 ml. Коагулацията се извършва при 85°С в продължение на 45 минути.

Сряда Фин II. Солна основа: магнезиев сулфат - 0,5 g; натриев цитрат - 1 g; фероамонячна стипца - 0,05 g; монозаместен калиев фосфат - 20 g; монозаместен амониев цитрат - 20 g; монозаместен натриев глутамат - 5 g; глицерин - 20 ml; дестилирана вода - до 1 литър.

Съставките се разтварят в посочения ред в топла дестилирана вода. Задайте pH 6,3-6,5. Стерилизирайте при 1 atm за 20 минути.

яйце среда. 12 яйца се измиват с четка със сапун, третират се със спирт. Разбива се със стерилна пинсета и се изсипва в стерилна колба с перли, която след добавяне на всяко яйце се разклаща до получаване на хомогенна маса. Добавете 10 ml 20% воден разтвормалахитово зелено и 300 мл физиологичен разтвор. Филтрира се през марлен филтър и се коагулира при 85°C за 30 минути.

Soton Synthetic Medium. Към 200 ml дестилирана вода добавете 4 g аспарагин, 0,5 g железен цитрат, 2 g лимонена киселина, 0,5 g магнезиев сулфат, 0,5 g основен калиев фосфат, 60 g глицерин, 800 ml дестилирана вода.

1. Морфология и културни свойства

Клетъчната стена е заобиколена от слой гликопептиди, наречени микозиди (микрокапсули).

Туберкулозният бацил трудно понася конвенционалните багрила (по Грам се оцветява за 24-30 часа). Грам-положителен.

Туберкулозният бацил има структурни особености и химичен съставклетъчна стена, които се отразяват във всички биологични свойства. Основната характеристика е, че клетъчната стена съдържа голямо количество липиди (до 60%). Повечето от тях са миколови киселини, които са включени в рамката на клетъчната стена, където са под формата на свободни гликопептиди, които са част от кордните фактори. Кордовите фактори определят естеството на растежа под формата на снопове.

Клетъчната стена съдържа липоарабиноманан. Неговите крайни фрагменти - капачка - определят способността на патогена да се свързва специфично с рецепторите на макрофагите.

Mycobacterium tuberculosis, оцветен по Ziehl-Neelsen. Този метод се основава на киселинната устойчивост на микобактериите, която се определя от характеристиките на химичния състав на клетъчната стена.

По вид производство на енергия аероби. Според температурните изисквания - мезофили.

Размножаването им е много бавно, времето за генериране е 14–16 ч. Това се дължи на изразената хидрофобност, която се дължи на високото съдържание на липиди. Това затруднява доставянето на хранителни вещества в клетката, което намалява метаболитната активност на клетката. Видимият растеж върху средата е 21–28 дни.

Всички тези среди трябва да бъдат допълнени с вещества, които инхибират растежа на замърсяващата флора.

На гъста хранителна среда се образуват характерни колонии: набръчкани, сухи, с назъбени ръбове, не се сливат една с друга.

В течна среда те растат под формата на филм. Филмът първоначално е нежен, сух, с времето се сгъстява, става неравно-набръчкан с жълтеникав оттенък. Средата не е прозрачна.

Туберкулозните бактерии имат определена биохимична активност и изследването й се използва за разграничаване на причинителя на туберкулозата от останалите представители на групата.

1) миколови киселини;

Причинителят на туберкулозата навлиза в тялото като част от фини аерозоли. Патогенът трябва да навлезе в алвеолите, където се абсорбира от резидентните макрофаги, връзката с които определя по-нататъшното развитие на инфекцията. Туберкулозата е класическа интрамакрофагална инфекция.

Вътре в макрофагите туберкулозните бактерии са устойчиви на бактерицидни фактори на фагоцитите поради мощна липидна мембрана.

Грануломът се развива веднага след инфекцията, но по-късно получава мощен тласък за развитие, когато в тялото се появят Т-лимфоцити, чувствителни към патогена.

Преимунният гранулом след 2-3 седмици под въздействието на Т-лимфоцитите се превръща в специфичен (постимунен), който се нарича туберкулома.

Допълнителни събития са свързани със специфично възпаление, което се основава на алергична реакция към бактериални антигени.

Белодробната туберкулоза е най-честата, но червата и мускулно-скелетната система също могат да бъдат засегнати, и пикочно-половата система, и т.н.

Има два патогенетични варианта на туберкулозата.

Развива се без алергия към патогена. В зоната на въвеждане патогенът се улавя от макрофаги, развива се неспецифична грануломатозна реакция. Бактериите лесно преминават тази бариера, бързо проникват в регионалните лимфни възли, кръвта и различни органи.

След 2-3 седмици се образува първичен туберкулозен комплекс, който включва:

1) първичен афект - фокус в белодробната тъкан;

2) лимфаденит - възпаление на регионалните лимфни възли;

3) лимфангит - възпаление на лимфните съдове.

Най-често се самоизлекува, претърпява фиброза и калцификация (огнище на Гон). Бактериите продължават да съществуват в този фокус, но не се освобождават във външната среда.

В други случаи се развива остра туберкулоза.

Възможна е и реинфекция отвън.

Развитието на вторична туберкулоза се улеснява от неблагоприятни условия на живот, хронични заболявания, алкохолизъм, стрес и др.

Характеристики на имунитета при туберкулоза:

1) нестерилни, поддържани от онези бактерии, които продължават да съществуват в тялото;

2) нестабилен, т.е. не предпазва от повторно активиране на ендогенна инфекция и повторно заразяване отвън;

3) образуват се антитела, но те нямат защитна стойност;

4) основният механизъм на имунитета е клетъчен; инфекциозната алергия е от първостепенно значение.

3. Диагностика. Предотвратяване. Лечение

1) микроскопско изследване. Правят се две цитонамазки от храчки. Единият се оцветява от Ziehl-Neelsen, вторият се третира с флуорохром и се изследва с помощта на директна флуоресцентна микроскопия. Е надежден метод;

2) бактериологично изследване. Изисква се. Недостатъкът е, че микобактериите растат бавно върху хранителни среди (4 седмици). По време на изследването се определя чувствителността към туберкулостатични лекарства.

Приложете ускорени методи за откриване на микобактерии в култури, например по метода на Price. Микроколониите позволяват да се види наличието на фактора на кабела, когато бактериите, които са го образували, са сгънати в плитки, вериги и снопове;

3) полимерна верижна реакция (PCR). Прилага се при извънбелодробни форми;

4) серодиагностика - ELISA, RPHA, флуоресцентна реакция. Не е водещ метод;

5) Проба Манту с туберкулин - алергологичен метод. Туберкулинът е препарат от убита култура от микобактерии. Пробата се поставя при подбора на лица за реваксинация за оценка на хода на туберкулозния процес;

6) микрокултивиране върху предметни стъкла в среда на Школников;

7) биологичен метод. Рядко се използва, когато патогенът е трудно да се изолира от изследвания материал. Материал от пациента заразява лабораторни животни (морски свинчета, зайци). Наблюдението се извършва до смъртта на животното, след което се изследва пунктатът на лимфните му възли.

Специфична профилактика: жива BCG ваксина. Ваксинацията се извършва в родилния дом на 4-7 дни от живота чрез интрадермален метод.

Реваксинацията се извършва на лица с отрицателен туберкулинов тест с интервал от 5-7 години до 30-годишна възраст. Така се създава инфекциозен имунитет, при който възниква реакция на свръхчувствителност от забавен тип.

Повечето антибиотици нямат ефект върху Mycobacterium tuberculosis, така че се използват туберкулостатични лекарства.

Използват се два вида лекарства:

1) лекарства от първа линия: изониазид, пиразинамид, стрептомицин, рифампицин, етамбутол, фтивазид;

2) лекарства от втора линия (с неефективността на лекарствата от първа линия): амикацин, каномицин, натриев аминосалицилат (PAS), дапсон, циклосерин и др.

Характеристики на лечението на туберкулоза:

1) лечението трябва да започне възможно най-рано, веднага след откриване на заболяването;

2) терапията винаги е комбинирана - прилагат се поне две лекарства;

3) се провежда дълго време (4–6 месеца), което е свързано с дълъг жизнен цикъл на микобактериите;

4) трябва да бъде непрекъснато, тъй като прекъсванията водят до образуване на резистентност на патогена и хронизиране на процеса.

40. Туберкулоза

Причинителят принадлежи към род Mycobacterium, изглед М. туберкулоза.

Това са тънки пръчици, леко извити, не образуват спори или капсули.

В резултат на лечение с противотуберкулозни лекарства патогенът може да загуби киселинна устойчивост.

Mycobacterium tuberculosis се характеризира с изразен полиморфизъм. Тяхната цитоплазмена мембрана съдържа характерни включвания - Fly grains. Микобактериите в човешкото тяло могат да се трансформират в L-форми.

Микобактериите са взискателни към хранителните среди. Растежни фактори - глицерол, аминокиселини. Те растат върху картофено-глицеринова, яйчно-глицеринова и синтетична среда.

Патогенеза

В резултат на взаимодействието на микобактерии и макрофаги се развива възпаление от грануломатозен тип под въздействието на вирулентни фактори.

От белите дробове туберкулозният бацил навлиза в регионалните лимфни възли, след което в кръвния поток.

Пътят на заразяване е въздушно-капков. Източникът е болен човек, който в острия период отделя туберкулозен бацил с храчка.

1. Първична туберкулоза. Среща се при лица, които преди това не са имали контакт с патогена. Инфекцията възниква в детството или юношеството.

2. Вторична туберкулоза. Протича хронично. Появява се при повторно активиране на първичния фокус (след 5 или повече години).

Патогенни микобактерии – Ф. К. Черкес

Глава 33

Туберкулозата е широко разпространена сред животни, птици, гризачи.

Има няколко вида туберкулозни бацили:

1. Човек - Mycobacterium tuberculosis

2. Говеда - Mycobacterium bovis

3. Птичи - Mycobacterium avium

4. Мишка - Mycobacterium murium

отглеждане. Причинителите на туберкулозата са аероби. Те растат при температура 37-38 ° C и рН 5,8-7,0 Отличителни културни характеристики на туберкулозния бацил са бавен растеж и взискателност към хранителни среди. Преди всичко те растат само на специални среди: Петраняни, Петров, Левенщайн-Йенсен. Те могат да се отглеждат върху глицеринов бульон, глицеринов агар, глицеринови картофи. Глицеринът стимулира растежа на микобактериите. M. bovis не се нуждае от глицерол. Най-широко използваната среда е Loevenshtein-Jensen, която се препоръчва от СЗО като стандартна среда за отглеждане на туберкулозни бацили. Понастоящем се използва и среда Finn II, която се различава от средата на Lowenstein-Jensen по това, че вместо аспарагин се използва натриев глутамин. В тази среда Mycobacterium tuberculosis расте малко по-бързо, отколкото в средата на Lowenstein-Jensen, и процентът на изолиране на културите е по-висок. Туберкулозните бацили могат да се култивират и върху синтетични среди, като например средата на Сотон.

В изсъхнали храчки те живеят до 10 месеца. При ниски температури Mycobacterium tuberculosis продължава дълго време.

От опитните животни чувствителни са зайците. Имат остра инфекция.

Източници на инфекция. Човек. Рядко животни.

При затворен процес туберкулозните бацили не се екскретират с храчки, урина и др.

По този начин, дори и при доброкачествен ход на процеса, тялото не се освобождава от туберкулозни патогени. Смята се, че 80% от хората са заразени с туберкулозни бактерии. Те обаче са клинично здрави. Когато тялото попадне в неблагоприятни условия, неговите защитни функции намаляват, туберкулозата претърпява некроза, бактериите се освобождават и включват нови области в процеса, настъпва обостряне, образуват се каверни - отворен процес. Понякога може да има генерализиране на процеса, което води тялото до смърт. По-често туберкулозата протича в хронична форма (затворен процес). Условията на труд и живот са от голямо значение по време на обостряне.

Лечение. Антибактериални лекарства: стрептомицин, рифампицин, PAS, фтивазид и др.

тестови въпроси

1. От кого и кога е открит причинителят на туберкулозата?

2. На какви видове се делят туберкулозните бацили? Какъв вид е патогенен за хората?

3. Какво определя резистентността на Mycobacterium tuberculosis?

4. Какъв метод се използва за оцветяване на петна за откриване на туберкулозни микобактерии?

5. В какви форми се разделят Mycobacterium tuberculosis и каква форма е патогенна?

Микробиологични изследвания

Целта на изследването: идентифициране на патогена.

1. Храчки (туберкулоза на белите дробове и бронхите).

2. Ексудат от плевралната кухина (белодробна туберкулоза, плеврата).

3. Асцитна течност и изпражнения (чревна форма на туберкулоза).

4. Урина (бъбречна туберкулоза).

5. Цереброспинална течност (туберкулозен менингит).

6. Кръв (генерализация на процеса).

Методи за събиране на материали

Напредък на изследванията

2. Как и защо се третира храчката преди засяването й върху хранителни среди?

3. Опишете растежа на туберкулозен бацил върху твърди и течни хранителни среди.

4. Кое животно е най-чувствително към човешкия тип туберкулозен бацил?

яйце среда. 12 яйца се измиват с четка със сапун, третират се със спирт. Разбива се със стерилна пинсета и се изсипва в стерилна колба с перли, която след добавяне на всяко яйце се разклаща до получаване на хомогенна маса. Добавете 10 ml 20% воден разтвор на малахитово зелено и 300 ml физиологичен разтвор. Филтрира се през марлен филтър и се коагулира при 85°C за 30 минути.

Soton Synthetic Medium. Към 200 ml дестилирана вода се добавят 4 g аспарагин, 0,5 g железен цитрат, 2 g лимонена киселина, 0,5 g магнезиев сулфат, 0,5 g основен калиев фосфат, 60 g глицерол, 800 ml дестилирана вода.

Микробиология на Mycobacterium tuberculosis

В рода MycobacteriumСемейството Mycobacteriaceae от раздела Firmicutes включва неподвижни аеробни Грам-положителни пръчковидни бактерии. Понякога образуват нишковидни структури, наподобяващи гъбичен мицел. Това беше основата за името им [гр. mykes, гъби и лат. бактерия, бактерия].

Ето защо микобактериианилинови багрила и конвенционалните методи за боядисване се възприемат слабо. За оцветяване се използват интензивни методи, обикновено Ziehl-Neelsen. Растат бавно или много бавно; сапрофитните видове растат малко по-бързо. Някои видове образуват каротеноидни пигменти, които не дифундират в средата.

Микобактериишироко разпространени в околната среда и причиняващи лезии, известни като микобактериози. Докладвани са заболявания при различни студенокръвни и топлокръвни животни; най-характерните лезии на кожата, белите дробове и лимфните възли.

Класификация на микобактериите

При класифицирането на микобактериитевземете предвид патогенността за хората, способността за образуване на пигменти, скоростта на растеж и способността да синтезирате никотинова киселина (ниацин).

Според патогенността се разграничават действително патогенни (причиняващи специфични заболявания), потенциално патогенни и сапрофитни. микобактерии. M. tuberculosis, M. leprae, M. bovis имат патогенни свойства за хората. Други видове, които причиняват лезии при хората, са известни като атипични микобактерии.

Според скоростта на растеж, бързорастящи (дават видим растеж на 4-7-ия ден), бавнорастящи (растеж се наблюдава след 7-10 дни или повече) и нерастящи върху изкуствени среди (M. leprae) видове микобактерии.

Според способността за образуване на пигменти се разграничават фотохромогенни (образуват пигмент на светлина), скотохромогенни (образуват пигмент на тъмно) и нефотохромогенни (не образуват пигмент). видове микобактерии.

Микробиология на Mycobacterium tuberculosis

Микробиологична диагностика 1. Основен метод е бактериологично изследване

txt fb2 ePub html

Cheat sheets по телефона - незаменимо нещо при полагане на изпити, подготовка за контролна работаи т.н. Благодарение на нашата услуга получавате възможност да изтеглите измамни листове по микробиология и биотехнология на телефона си. Всички cheat sheets са представени в популярни формати fb2, txt, ePub, html, а има и java версия на cheat sheet под формата на удобно приложение за мобилен телефон, което може да бъде изтеглено за номинална такса. Достатъчно е да изтеглите измамни листове по микробиология и биотехнология - и не се страхувате от никакъв изпит!

Не намерихте ли това, което търсихте?

Ако имате нужда от индивидуален подбор или работа по поръчка - използвайте тази форма.

Диагноза: 1) микроскопско изследване. Правят се две цитонамазки от храчки. един

Туберкулоза

Причинителят принадлежи към род Mycobacterium, вид M. tuberculesis.

Това са тънки пръчици, леко извити, не образуват спори или капсули.

Туберкулозният бацил има характеристики - клетъчната стена съдържа голямо количество липиди (до 60%). Повечето от тях са миколови киселини, които са включени в рамката на клетъчната стена, където са под формата на свободни гликопептиди, които са част от кордните фактори. Кордовите фактори определят естеството на растежа под формата на снопове.

Mycobacterium tuberculosis, оцветен по Ziehl-Neelsen. Този метод се основава на киселинната устойчивост на микобактериите.

В резултат на лечение с противотуберкулозни лекарства патогенът може да загуби киселинна устойчивост.

На гъста хранителна среда се образуват характерни колонии: набръчкани, сухи, с неравни ръбове.

Причинителят на туберкулозата навлиза в тялото като част от фини аерозоли. Патогенът трябва да навлезе в алвеолите, където се поглъщат от резидентни макрофаги.

От белите дробове туберкулозният бацил навлиза в регионалните лимфни възли, след което в кръвния поток.

Най-честа е белодробната туберкулоза, но могат да бъдат засегнати и червата, опорно-двигателният апарат, пикочно-половата система и др.. Различават се два патогенетични варианта на туберкулозата.

След 2-3 седмици се образува първичен туберкулозен комплекс (първичен афект, лимфаденит, лимфангит).

Най-често се самоизлекува, претърпява фиброза и калцификация (огнище на Гон). В други случаи се развива остра туберкулоза.

Развитието на вторична туберкулоза се улеснява от неблагоприятни условия на живот, хронични заболявания, алкохолизъм и др.